Validation interne de l’extraction d’ADN par la méthode de billes magnétiques à partir d’un prélèvement de référence (Salive)

Abstract

Le laboratoire de la police scientifique et technique vise l’accréditation du département de biologie légale. Pour cela, tous le matériel et kits, notamment la méthode d’extraction d’ADN, doivent être validés selon les recommandations de la norme ISO 17025. Une bonne méthode d’extraction est capable de fournir des quantités suffisantes d’ADN pour l’établissement de profils génétiques et minimiser les inhibiteurs et toutes sortes d’impuretés.

Cette étude avait pour but, de valider en interne la méthode d’extraction d’ADN, utilisant la technologie «billes magnétiques», fournie par le kit Smart D-N-Adem-Kit Profiling. Cette extraction se fait à partir d’un prélèvement de référence «salive» en séparant les molécules d’ADN par des billes magnétiques. Cette technique doit produire une quantité d’ADN qui doit être ≥0.05ng/µl pour pouvoir augmenter de manière significative la qualité des profils génétiques obtenus et par conséquent améliorer l’efficacité des laboratoires de médecine légale.

Nous avons vérifié la performance et la fiabilité du kit Smart D-N-Adem à travers l’étude de trois critères importants de validation interne à savoir : la répétabilité, la reproductibilité et la sensibilité. En effet, les résultats des tests de répétabilité et de reproductibilité de la méthode d’extraction d’ADN, à partir des échantillons de salive quantifiés, était satisfaisants, avec des fluctuations raisonnables. Par ailleurs, un test de sensibilité effectué en diluant de la salive jusqu’au 1/32ème a donné une quantité d’ADN suffisante et requise pour produire un profil génétique complet et interprétable.

Afin de vérifier que le kit Smart D-N-Adem par la méthode des billes magnétiques est bien conçu pour permettre le passage à l’etape d’amplification sans quantification préalable , nous avons directement amplifié les échantillons de salive extraits par PCR. Les résultats de cette étape restent comparables à ceux donnés par le fabricant.

Cette validation interne du kit Smart D-N-Adem a permis de donner un meilleur rendement et une plus grande rapidité avec une bonne qualité.