Comparaison entre deux techniques d’extraction de l’ADN (Manuelle et Automatisée)

Abstract

Au cours de ces dernières années, la génétique moléculaire a modifié considérablement les protocoles et les techniques classiques d’extraction et de purification des acides nucléiques.

Les Kits commercialisés prêts à l’emploi sont l’exemple typique de cette modification, car ; ils sont devenus indispensables dans un laboratoire de Biologie Moléculaire.

Utilisés seuls ou combinés avec un automate reste un choix qui dépend de plusieurs paramètres.

La comparaison entre les deux approches (manuelle ou automatique) est l’objectif de cette étude.

Les résultats obtenus après les processus d’extraction d’ADN génomique du sang humain par un kit pour l’extraction manuelle (Wizard®Genomic DAN PurificationA1120), et les même échantillons extraits par un Kit pour l’utilisation automatique (Maxwell®16 Blood DNA Purification Kit AS1010) ; révèlent que chacune de ces deux méthodes fait gagner à l’opérateur certains avantages.

En effet, l’utilisation des kits manuels permet de gagner en termes de concentration de l’ADN obtenu dont la moyenne était de 504.28µg/ml ; alors que le point fort de la méthode automatique est sans doute la simplicité et rapidité de la manipulation, la concentration de l’ADN est de 228.87µg/ml ; mais aussi le volume du sang initial nécessaire pour l’extraction qui est de 400µl contre 3ml pour la première technique.

En terme de pureté ; plus de 80% des échantillons générés de l’extraction par les deux méthodes étaient contamines par des protéines.