La cryoconservation de la semence équine avec essais de congélation différée

Abstract

La présente étude a pour objectif d’évaluer l’effet des différents temps d’équilibration sur la motilité et l’intégrité fonctionnelle des spermatozoïdes congelés chez les équins. Pour le faire une vingtaines d’éjaculats récoltés à partir de cinq (05) étalons de race Pur-sang Arabe ont été utilisés. Chaque éjaculat a été évalué initialement par les systèmes CASA : r Computer-AidedSpermAnalysis) et la CMF : Cytométrie en flux ). Ce qui permet une analyse automatique, répétitive et précise d’un échantillon de spermes selon les paramètres de: mobilité, concentration, morphologie, fragmentation de l’ADN, vitalité, la réaction de l’acrosome et les leucocytes. Les échantillons de sperme sont mis en équilibration à 4°C dans un diluant commercial pendant 2h, 24h, 48h, 72h dans une vitrine réfrigérée, puis congelé ensuite décongelé puis évalué à nouveau. Le temps d’équilibration dans la congélation ne diffère pas significativement par rapport à la variable du temps, 2h, 24h, 48h, 72h, en comparaison avec le temps conventionnel qui est de 2h. La concentration de 2.5% en glycérol (INRA-Freeze) est une concentration optimale pour une congélation des spermatozoïdes équins. Une centrifugation de la semence équine (600xg, 10mn sur un coussin « Maxifreeze® ») a réduit le taux des pertes en cellules à 12% associé à une bonne viabilité-acrosomial. La nouvelle approche de la congélation du sperme préalablement refroidi pour 2h, 24h, 48h, 72h peut être une méthode appropriée pour réduire de nombreux problèmes liés au risque de transport d’équipement coûteux, ou un étalon d’un endroit à un autre