Comparaison de plusieurs techniques d’évaluation de la concentration des spermatozoïdes bovins après cryoconservation

Abstract

Le présent travail vise l’évaluation de l’efficacité d’un système CASA (pour Computer Aided Sperm Analyser) (Hamilton Thorn-IVOS II) à mesurer la concentration des spermatozoïdes dans des paillettes de semence bovine congelée, comparativement à la technique conventionnelle recommandée par l’OMS (Numération par l’hématimètre amélioré de Neubauer). Pour optimiser cet analyseur, deux facteurs pouvant influer sur la mesure de la concentration sont étudiés, en l’occurrence la chambre d’analyse (i.e. la lame Leja ® versus la cellule de Makler ®) et pour chaque chambre le mouvement des spermatozoïdes (spermatozoïdes mobiles versus immobilisés). Cinquante paillettes fines (0.25mL) de semence bovine produites par « le Centre Nationale d’Insémination Artificielle et d’Amélioration Génétique de Baba-Ali » sont décongelées, puis analysées par les cinq techniques citées ci-dessus et chaque analyse est répliquée cinq fois pour calculer le coefficient de variation (CV, %). Les données sont traitées par le logiciel « R » et une analyse de variance (ANOVA) permet la comparaison (n=50, p<0.05) entre les différentes techniques étudiées. Sur la base des études précédentes effectuées sur la semence d’autres espèces animales, le système Hamilton Thorn–IVOS II pourrait représenter une bonne alternative à la technique conventionnelle dans l’évaluation de la concentration des spermatozoïdes bovins congelés en paillettes. Cet analyseur pourrait être optimisé par l’utilisation d’une chambre d’analyse capable de corriger l’effet Segré-Silberberg (Leja® 20μm) et par l’immobilisation des cellules spermatiques avant analyse, afin de prévenir le phénomène de collision et de diffraction des trajectoires de spermatozoïdes. Cette technique d’analyse, une fois optimisée, présentera l’avantage d’être objective, automatisée, très rapide et de ce fait parfaitement adaptée au contexte du contrôle de qualité dans les centres de production de semence.