Étude de la sensibilité d’une technique RT- PCR par mesure du titrage viral

Abstract

Le Centre National de Référence OMS pour la Grippe de l’Institut Pasteur d’Algérie a mis en point la technique du titrage du virus de la grippe en dilutions limites (DICT50), qui permet non seulement de tester la sensibilité des cellules MDCK utilisées lors de l’isolement du virus Influenza, mais aussi pour déterminer la concentration du virus qui permet d’inhiber 50% de cellules en culture. Un total de 68 souches virales A/H3N2 a été testé. Ces souches ont été isolées au CNR Grippe de l’Institut Pasteur d’Algérie, durant la période allant de 2009 au Avril 2016. Cet échantillon a été choisi du faite de la fréquente modification antigénique des souches A/H3N2, qui sont responsables chaque année d’épidémies. A fin d’étudier l’apport de la sensibilité cellulaire dans la validation d’une méthode moléculaire « la RT-PCR » en temps réel pour la détection du virus de la grippe, nous avons eu recours a deux techniques : Le titrage du virus de la grippe en dilutions limites (Détermination de la DICT50) et la technique de la RT-PCR en temps réel pour la quantification de l’ARN virale. Pour cela, nous avons testé une souche de référence, fournis de l’Institut Pasteur Paris. Les résultats obtenus par la technique de dilution limites comparés à ceux obtenus par la technique RT-PCR montrent qu’il n’ya pas une corrélation entre les valeurs de la DICT50 et le nombre de cycle Ct des 68 souches A/H3N2 Algérienne.