Extraction et identification des métabolites secondaires des champignons endophytes Beauveria bassiana, Clonostachys rosea et Phomopsis spp.

Abstract

La présente étude s’intéresse à l’extraction et l’identification des métabolites secondaires à partir de cinq champignons endophytes qui sont connus par la synthèse de certains enzymes présentant un intérêt agrobiotechnologique. L’activité antagoniste des extraits de ces souches a été évaluée à l’encontre de deux champignons phytopathogènes responsables du flétrissement vasculaire sur deux plantes économiquement importantes (tomate et palmier dattier). Les tests qualitatifs des enzymes extracellulaires produites par les champignons endophytes Beauveria bassiana (Sn182), Phomopsis (C141), et les trois souches de Clonostachys rosea {G133, C318 (1), C318 (2)} ont montré que toutes les souches (100%) produisent de la chitinase et de la phosphatase. 80 % des souches testées ont une activité protéolytique à l’exception de G133. Seul la souche B. bassiana a la capacité de produire la lipase et l’estérase, alors qu'aucune souche n’a pu produire l’amylase ni la pectinase. L’analyse par chromatographie sur couche mince de l’extrait d’acétate d’éthyle de B. bassiana indique que les phases mobiles utilisées (acétone, eau, toluéne, acide acitique glacial) et (acétate d’éthyl métahnol) ne permettent pas la séparation des différents composés décrits dans la littérature contenus dans l’extrait de B.bassiana. Cette analyse a montré également que cette souche ne produise pas les deux standards testés : l’ampicilline et le kétoconazole. Les extraits obtenus par l’extraction à l’acétate d’éthyle et le chloroforme des cinq endophytes testés sur deux champignons phytopathogènes par la méthode de diffusion sur disque, ont montré des zones d’inhibition variant de 0 à 19 mm pour les extraits d’acétate d’éthyle, et de 0 à 13 mm pour les extraits chloroformiques. Ces variations dépendent des extraits testés et des pathogènes étudiés. Les résultats montrent la présence de métabolites intéressantes, qui peuvent être de nature peptidique (enzymes) et qui joue un rôle important dans la lutte biologique mais ils restent toujours préliminaires