Régénération des protoplastes par embryogénèse somatique chez le palmier Dattier (Phoenix dactylifera L.)

Abstract

L’objectif de ce travail est de régénérer des protoplastes par l’embryogénèse somatique chez le palmier dattier (Phoenix dactylifera L.). L'importance de l'application d'embryogenèse somatique en culture des tissus sert nécessairement à la préservation de notre phoeniciculture. Des souches de cals friables embryogénes de trois cultivars Deglet Nour, Takerboucht et Tegaza ont été utilisées pour l’obtention de la suspension cellulaire, cette dernière a été établie sur le milieu de culture P5 contenant 5mg/l de picloram. Des protoplastes ont été isolés à partir des suspensions cellulaires embryogénes sous l'action de la combinaison enzymatique (cellulase 2% et Hémicellulose 6%). Cette solution a donné de meilleurs résultats et confirme les travaux obtenus au sein de l'équipe du laboratoire biotechnologie et amélioration des plantes de l'INRAA. Les protoplastes obtenus ont été mises en cultures sur le milieu PcM2 (couche nourricière) contenant tous les éléments nutritifs nécessaires pour la régénération des protoplastes et qui sont semblable à ceux des cellules et des tissus en cultures. Lors de la reconstitution des parois, les cellules des protoplastes prennent une forme ovale et se divise intensément induisant la formation des petits cals embryogènes. Après un mois de mise en culture sur la couche nourricière, les micros cals obtenus ont été transférés sur un milieu M100 qui a permet leurs développement en cals. Les cals sont ensuite transférés sur un milieu dépourvu de régulateurs de croissance GMN200 qui a permis leur évolution en embryon. Les embryons néoformés germent et évoluent en plantules feuillées, après leur germination, ils sont ensuite transférés sur le milieu GMP contenant de l'AIB pour leur développement rapide en plantules et leurs enracinement.