Optimisation quantitative et qualitative de L'ADN obtenu a partir de la brosse a dents pour établir une empeeinte génétique

Abstract

L'empreinte génétique, est le résultat d'une analyse génétique, rendant possible l'identification d'une personne à partir d'une petite quantité de ses tissus biologiques. Dans l'identification humaine, la brosse à dents de la victime est un objet personnel précieux ou se dépose du matériel cellulaire qui contient de l'ADN à partir duquel un profil de référence peut être produit, un profil qui nous permet de faire une comparaison directe avec le profil d'un corps non identifié. Ce travail à été effectuée avec un prélèvement de cinq faisceaux de poils de la brosse à dents, de prime à bord nous avons testé les poils avec le phadebas qui atteste la présence ou l’absence de la salive. Dans certains cas le test se révèle négatif, ceci confirme que c’est le cumul des cellules épithéliales sur la brosse à dents qui nous permet d’obtenir de l’ADN et par conséquent un profil génétique. La période minimale d'utilisation de la brosse à dents pour garder suffisamment de cellules pour le génotypage a également été étudiée. Nous avons également testé deux méthodes d'extraction d'ADN couramment utilisés: extraction organique au phénol et une extraction par Kit QIAGEN, pour explorer l’efficacité de ces deux méthodes d’extractions. Lors de cette expérience, les quatre bénévoles qui font partie de la même famille brossent leurs dents pour; 1 j, 7 j, 14 j, la quantité d'ADN récupéré a été quantifiée par PCR quantitative en temps réel, et le profilage (génotypage) de chaque échantillon est effectué avec deux kits d’amplifications Identifiler et Identifiler plus. Les données ont montré l'efficacité des deux méthodes d'extraction dans le rendement de l'ADN en matière de pureté, le kit QIAGEN nous a donné des quantités plus remarquables que l'extraction organique mais cette reste dérniére reste toujours robuste, toutes les brosses à dents génére des profils complets, même avec une quantité de 0.0125 ug/μl. on a prouvé aussi le lien de parenté entre les membres de la même famille.