Etude de validation d’un protocole de séquençage des régions hypervariables de l’ADN mitochondrial humain référence dans le cadre de l’identification génétique

Abstract

En criminalistique l’état de l’échantillon de l’ADN est un point clé pour aboutir à une identification fiable. Pour pallier au soucis rencontrés avec l’ADN nucléaire en analyses, l’utilisation de l’ADNmt dans ce domaine est devenue incontournable.

Dans le but d’élaborer un protocole pour l’identification génétique par l’ADNmt, notre travail porte sur le séquençage des régions hypervariables de la région de contrôle (D-Loop) d’un ADN mitochondrial de source connue (non dégradé) à partir d’échantillons biologiques de type salive.

Notre étude s’est déroulée au sein du laboratoire du département de biologie de l’INCC de la Gendarmerie Nationale d’Alger. Toutes les étapes du protocole ont été analysées tour à tour dont les principales étant l’extraction de l’ADN mitochondrial, son amplification, son séquençage en suivant trois différents designs de primers. La lecture et l’interprétation des résultats ont également fait l’objet de l’analyse en utilisant deux logiciels le Sequencher® v5.4.2 et le Sequencing Analysis Software v6.0 Applied Biosystems™.

A travers l’élaboration de ce protocole nous avons pu, d’une part obtenir le mitotype de chaque échantillon analysé et d’autre part contribuer à sa validation en utilisant différents critères et différentes procédures. Nous avons eu aussi la possibilité d’appuyer notre protocole et les différents choix en se référant à des études précédentes. Enfin notre étude nous a permis d’améliorer le protocole afin d’avoir de meilleurs résultats d’analyses.