Validation analytique de la méthode de séparation chirale des énantiomère de l’ibuprofène par Chromatographie Liquide à Haute Performance (HPLC)

Abstract

L’objectif de notre travail est la validation d’une méthode analytique de séparation chiraled’un mélange racémique d’ibuprofène, c’est un anti-inflammatoire non-stéroïdien (AINS), eutilisant la technique de chromatographie liquide à haute performance HPLC. Cette séparationa été réalisée par un appareil HPLC de type Agilent 1260 technologies avec une colonne chirale Ultron-ES-OVM (150 × 4.6 mm) à base de protéine. Nous avons utilisé une phase mobile constituée de (30/70 % MeOH/KH2 PO4), avec une concentration de (KH2 PO4)50 mM à pH 3. 22, à température ambiante. La validation de la méthode selon le guideline l’ICH 2005 Q2(R1) « la ConférencInternationale d'harmonisation »[1], donner des résultats conforme aux critères d'acceptabilitételle que la spécificité montrant que les deux pics de l'ibuprofène sont distincts bien séparé sansinterférence significative au des autres pics de la phase mobile, avec un temps de rétentiontr1=9.186 min et tr2=10.299 min, par conséquent les résultats de la linéarité sur une gamme deconcentration allant de 0,01 à 0.9 mg/ml donner un excellente linéarité avec un coefficient dcorrélation (R²) est de (R1=0,998 et R2=0,9928), quant aux résultats de la précision inter-joursont conforme aux critères d'acceptabilité (RSD) ≥ 15%, la déviation standard relative variéentre (RSD1 ; 0,08149 et 3,89567) et (RSD2 ; 0,11635 et 6,47649). D'autre part, la répétabilitest bien validée, ce qui assure la fidélité de la méthode avec une valeur de la déviation standardrelative inférieure à 2 % (RSD1 % = 0,908) et (RSD2 % = 1,41 %). Les résultats de la limite dedétection et de quantification obtenues confirment la haute sensibilité de la méthode HPLC(LD1=0,00247325) et (LD2=0,001867689), (LQ1=0,007494724) et (LQ2=0,005659664). Lerésultats de la robustesse donnent des valeurs de temps de rétention qui ne diffèrent pasensiblement les unes des autres, donc la méthode résiste aux variations mineures des conditionsexpérimentales. La technique s’est montrée valide pour les utilisations définies et en conformitparfaite avec les critères de validation définis par l’ICH 2005 Q2(R1). Mot-clé : validation, HPLC, ibuprofène, énantiomères, chirale.