Etablissement de l’embryogénèse somatique à partir des protoplastes du palmier dattier (Phoenix dactylifera L.) et caractérisation moléculaire du matériel génétique

Abstract

L’objectif de ce travail est la régénération et la caractérisation moléculaire du matériel génétique chez les trois cultivars de palmier dattier (Phoenix dactylifera L) : Deglet Nour, Takerboucht et Tagaza. L’induction de l’embryogénèse somatique a lieu sur le milieu GMN200 à une photopériode 16h de lumière et à une température 28°C, la germination des embryons somatiques est obtenue sur le milieu MS modifié sans hormones de croissance avec un taux de germination 56.33%. L’élongation et l’enracinement des plantules sont obtenus sur milieu GMP (Milieu de germination) contenant 100 mg/l de Thiamine chlorhydrate, 170mg/l de NH2PO4, 200 mg/l de Nitrate d’ammonium, 40 mg/l d’Adenine, 50 mg/l de Acide nicotinique, 50 mg/l de pyridoxine. Ce travail nous a permis de produire 80 plantules et 182 touffes de plantules prêtes à l’acclimatation. Concernant l’effet d’acclimatation, les vitroplants obtenus in vitro ont été acclimatées avec succès à partir de la première semaine marquant la meilleure survie jusqu’à la huitième semaine, avec un pourcentage de réussite moyen 68.3%. La caractérisation moléculaire des vitroplants issus de la régénération des protoplastes par embryogénèse somatique est réalisée d’abord par l’extraction de l’ADN suivie par deux méthodes d’analyses permettant de quantifier et d’analyser la pureté de l’ADN: la technique de la migration sur gel d’agarose et le Nanodrop, les résultats obtenus montre que l’ADN est de bonne qualité, avec des concentrations de l’ordre de 100 à 880.02 ng/ul et des ratios typiques pour l’ensemble des échantillons avoisinant le 1.8 pour la DO 260/230et des valeurs de 2.27 à 2.36 pour la DO 260/230